研究报告

蓖麻质膜型 Na+/H+逆向转运蛋白基因(RcSOS1)克隆及表达载体构建  

李平1,2,3,4,5 , 王晓宇1,2,3,4,5 , 徐惠1 , 王学娟1 , 张继星1,2,3,4,5*
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 12 篇   
收稿日期: 2017年09月04日    接受日期: 2017年10月04日    发表日期: 2018年06月28日
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摘要

根据其他物种中保守的 SOS1 基因序列,设计简并引物,利用 RT-PCR RACE 的方法克隆得到RcSOS1 (NCBI 注册号: KX943304.1)基因序列,开放阅读框包含 3 432 个核苷酸,推导编码的蛋白质有 1 143个氨基酸残基组成,与麻疯树 SOS1 基因的同源性最高,达到了 80.4%,编码一种Na+/H+逆向转运蛋白。疏水性分析显示 RcSOS1 基因编码蛋白 N- 末端具有 12 个跨膜结构域,C- 末端具有一个很长且面向质膜内腔的亲水尾部。RcSOS1 蛋白二级结构以 - 螺旋,无规则卷曲为主,其次为延伸链和 - 转角,所占比例最少。三级结构分析表明,RcSOS1 蛋白是位于质膜上的 Na+/H+ 逆向转运蛋白。根据 RcSOS1 全长序列设计带有BamHSal 位点的全长扩增引物扩增基因全长,用 BamH Sal 双酶切后与表达载体 pCG-1301 连接,成功构建了 RcSOS1 基因的正义表达载体,为深入研究 RcSOS1 基因的功能及耐盐的调控作用提供了帮助。

关键词
蓖麻;质膜 Na+/H+ 逆向转运蛋白; 生物信息学分析;表达载体构建

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《分子植物育种》印刷版
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